蛋白被泛素化后（即蛋白上结合了泛素），意味着将要被运往蛋白酶体降解，一般用于降解细胞内老弱病残蛋白，再回收利用。同时也被用于排除异己，抵御外敌。该过程需要一系列酶介导：泛素***酶（E1）、泛素偶联酶（E2）和泛素E3连接酶（E3）。其中E3是起特异性识别作用的，即决定谁该被降解，不能把好同志降解掉。所以E3基因很多，植物中主要有四种类型：HECT、RING、U-box和CRLs。其中CRLs是植物中含量**丰富的E3连接酶。本研究中，通过酵母双杂交筛选到的标题蛋白MdBT2，整好是CRLs亚家族之一。因此作者推测MdBT2可能在与ApNMV1a结合后，起到了促进其泛素化和降解的作用。酵母结构及功能介绍酵母的应用。江苏应用酵母文库做什么

通过酵母双杂交进行筛选，结果显示 SWC6 可以在蓝光下与 CRY1 相互作用（图 A-C）。同样，酵母双杂交实验显示 CRY2 也可以在蓝光下与 SWC6 相互作用（图 D）。并通过 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验（图 E-L）证实 CRY1、CRY2 与 SWC6 的结合是蓝光依赖性的。SWC6 是真核生物中已报道的 SWR1 复合物亚基，负责催化 H2A.Z 在染色质上的替换。已报道 SWR1 复合物中 SWC6 可以与 ARP6 亚基结合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验（图 A-H）显示，CRY1、CRY2 可以蓝光依赖性与 ARP6 结合。河北应用酵母文库做什么酵母双杂交原理 酵母双杂...。

酵母双杂交、GSTpull-down实验显示，SWC6可以直接与HY5、HYH相互作用（图A-C）。pull-down实验显示ARP6同样可以与HY5、HYH相互作用（图D）。split-LUC、Co-IP实验证实HY5可以与SWC6、ARP6结合（图E-J）。下胚轴表型分析显示，蓝光下arp6hy5hyh三突变体下胚轴长度明显大于arp6突变体、hy5hyh双突变体，表明ARP6和HY5有可能通过不同途径调控下胚轴的发育。Semi-in vivo pull-down、Co-IP 实验显示，蓝光下，在 CRY1 存在下，SWC6 与 ARP6 的结合***增强。表明蓝光***的 CRY1 可能通过蓝光依赖的 CRY1-SWC6/ARP6 相互作用增强 SWC6 与 ARP6 的结合。

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小欧从2018年即开始关注酵母杂交与高通量测序相结合的技术发展，如2017年CaoGang老师等发表的RLL-Y2H技术，实现了文库筛文库可能，该技术通过对酵母双杂常用载体的改造，并结合高通量测序，可直接获得AD-BD互作蛋白对。所用方法相当巧妙，感兴趣的同学请点击《当酵母双杂交遇到高通量测序》。钮老师团队之前的研究已经鉴定了DAL1作为一种保守的针叶树年龄生物标记基因，在油松从营养生长到生殖生长的时相转变过程中起重要作用。为了进一步理解年龄效应如何驱动针叶树的发育，阐明与DAL1相关的蛋白互作网络很关键。钮老师团队利用传统的Y2H筛选技术结合NGS测序技术，优化得到了Y2H-seq技术，与传统的筛选测序相比，大幅度节省了时间和实验成本。酵母三杂交酵母文库数据库。浙江应用酵母文库做什么

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酵母单杂交结果显示，磷酸盐饥饿响应因子OsPHR1/2/3可以***51个目标启动子中的25个，包括OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A等。OsRAM1、OsRAD1、OsWRI5A自身又可以调控许多菌根共生相关基因的表达（图A）。对丛枝菌根共生响应基因启动子序列预测分析显示，有78个转录因子被富集，87%的菌根共生响应基因受到OsPHR1/2/3的调控，其中42%受到OsPHR1/2/3的直接调控。因此推测OsPHR1/2/3可能是菌根共生调控网络中的一个关键调控枢纽（图A-B）。EMSA和荧光素酶报告实验证实，OsPHR12可以直接结合并***OsRAM1、OsWRI5A、OsPT11、OsAMT3启动子序列（图C-F），并且这种结合依赖于启动子中的P1BS元件（图G）。江苏应用酵母文库做什么

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